【英文名称】

【标准编号】GB14974-94

【代替编号】

【颁布单位】中华人民共和国卫生部

【颁布时间】1994-03-18

【实施时间】1994-09-01

【内容】

中华人民共和国国家标准 苹果和山楂制品中展青霉素限量卫生标准 GB14974-94 Hygienic ctandard for tolerance limits of patulin in applw and hawthorn products 中华人民共和国卫生部1994-03-18批准   1994-09-01实施 1 主题内容与适用范围     本标准规定了苹果、山楂制品中展青霉素限量及检验方法。     本标准适用于苹果、山楂制品及其半成品（原汁、原酱）。 2 苹果山楂制品中展青霉素最高允许量 苹果山楂制品中展青霉素最高允许量见下表。 品种 指标，g/kg 半成品（原汁原酱）≤ 100 果汁果酱≤ 50 果酒≤ 50 罐头≤ 50 山楂条（饼）≤ 50 3 检验方法 3.1 原理     样品中展青霉素经提取、净化、浓缩、薄层展开后，利用薄层扫描仪进行紫外反射光扫描定量。 3.2 试剂 3.2.1 硅胶GF254。 3.2.2 薄层色谱展开剂 横向：氯仿--丙酮（30：1.5）；纵向：（甲苯--乙酸乙酯--甲酸（50：15：1）。 3.2.3 展青霉素标准品。 3.2.4 乙酸乙酯。 3.2.5 1.5%碳酸钠溶液。 3.2.6 无水硫酸钠。 3.2.7 三氯甲烷。 3.2.8 显示剂 溶解0．1gMBTH. Hcl. H2O3-甲基-2苯并噻唑酮腙水合盐酸盐于 20mL蒸馏水中，至于冰箱中保存，每3天重新配制。 3.3 仪器 3.3.1 薄层扫描仪。 3.3.2 层析槽(内径 11．5cm、高20cm的标准缶)。 3.3.3 玻璃板10cm×10cm。 3.3.4 紫外光灯。 3.4 操作方法 3.4.1 提取 3.4.1.1果汁果酒:量取果汁25mL，置于分液漏斗中，加入等体积的乙酸乙酯，振摇2min，静置分层，重复以上步骤两次，合并有机相，加2．5mL1.5％碳酸钠振播 1min，静置分层后，弃去碳酸钠层，同上步骤再用碳酸钠处理一次。将提取液滤入100mL梨形瓶中，于40℃水浴上用真空减压浓缩至近干，用少许氯仿清洗瓶壁，浓缩干,加氯仿0．4mL定容，供薄层色谱测定用。 3.4.1.2 果酱：称取样品25g至于乳钵中，加适量无水硫酸钠研磨后，称至三角瓶中，加80mL乙酸乙酯浸泡30min，振荡30min，过滤，取滤液50mL，以下操作同3.4.1.1。 3.4.2 测定 3.4.2.1 薄层板的制备：取硅胶 GF2545g，加水15mL，涂布 10cm x 10cm玻璃板上，一次涂成5块，薄层厚度为0．3mm，阴干后，105℃烘烤2h，放入干燥器中备用。 3.4.2.2 点样：取一块薄板，在距底边和右边10cm处，用微量注射器滴加1．0μg／mL的展青霉素标准液10μL，相距左边4cm处滴加10μL样液，在样品点同一垂直线上，距顶端2cm处点20ng的标准液，位位置参考点。 3.4.2.3 展开     横向展开到顶端后取出挥干，进行纵向展开，至顶端后，取出挥干，在254nm紫外灯下观察，出现黑色吸收点则样品为阳性。进行扫描定量测定。 3.2.2.4 薄层色谱扫描测定     仪器操作条件；测定波长270nm，参考波长310nm；反射光测定；扫描速率40nm／min；记录仪纸速20nm／min ;测定标准及样品中展青霉素峰面积。 3.4.2.5 阳性样品的确证，将阳性样品的薄层色谱板，喷以 MBTH显色剂，130℃烘烤15min，冷至室温后，于365nm紫外灯下观察，展青霉素应呈橙黄色点。 3.4.2.6 计算     A          1 果汁：X=c╳---╳V╳D╳---………………………（1）     S          V1             A           1    8 果酱：X=c╳---╳V╳D╳---╳---………………………（2）     S          W    5 式中：X——展青霉素含量，μ／mL；       c——展青霉素标准液浓度，μg／mL；       A——样液展青霉素峰面积；       S——标准溶液展青霉素峰面积；       V——加入氯仿定容体积，mL；       D——样液点稀释倍数；       W——样品的重量，g；       V1——液体样品的体积，mL。 3.5 精密度：变异系数（%）小于10%。 3.6 最低检出限：3μg/L。